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山东地方规范《维生素的同步快速测定 高效液相色谱法》
www.fd17.com ?2019-08-02 09:45 ?

  本标准适用于复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯的测定。其他饲料可参照执行。

  原理

  试样中的维生素A乙酸酯、维生素D3和维生素E乙酸酯用二甲基亚砜(DMSO)超声溶解,经正己烷萃取、浓缩、复溶后,供高效液相色谱仪测定,外标法定量。

  1、高效液相色谱仪:配有紫外或二极管阵列检测器。

  2、电子天平:感量为0.1 mg和0.01 mg。

  3、紫外分光光度计。

  4、超声波振荡器。

  5、振荡器:频率不低于250次/min。

  6、旋转蒸发器。

  7、氮吹仪。

  8、平底烧瓶(具塞):棕色500 mL。

  样品提取

  平行做两份试验。称取试样1~3 g(准确至0.1 mg),置于500 mL平底烧瓶中,加30 mL的DMSO(4.3),在超声波水浴中超声提取30 min(水温不宜超过35度;中间旋摇2~3次以防样品附着瓶底);取出放置冷却。

  液相色谱参考条件

  色谱柱:C18,长250 mm,内径4.6 mm,粒径5 ?m,或性能相当者。

  柱温:30 ℃;

  进样量:10 μL;

  流动相:甲醇+水=97+3;

  流速:1.0 mL/min;

  检测波长:维生素A乙酸酯 325 nm;维生素D3 264 nm;维生素E乙酸酯 285 nm。

  精密度

  在重复性条件下两次独立测试结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的10 %。

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